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TransIT-X2轉染試劑--低毒轉染試劑產品介紹

更新時間:2023-05-17   點擊次數:940次

TransIT-X2® DYNAMIC DELIVERY SYSTEM


高效  — — 完-美的廣譜轉染試劑

實用性廣 — — 可以適合用于DNA質粒,siRNA/miRNA以及RNP復合物

科技 — — 非脂質體,陽離子聚合物遞送

 

Mirus X2轉染系統通過創新的聚合物體系有效地將DNARNA從核內體遞送到細胞質中,克服了核酸遞送的關鍵障礙。

如需購買Mirus轉染試劑,請聯系Mirus授權全國代理--欣博盛生物


TransIT-X2轉染試劑

1.TransIT-X2® Dynamic Delivery System可在多種細胞類型中實現較高水平的基因表達

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)和Lipofectamine®2000轉染試劑(Thermo Fisher Scientific)試劑與DNA 3:1將編碼熒光素酶的質粒DNA轉染到41種不同的細胞類型中。使用標準熒光素酶測定法比較轉染后24小時的熒光素素酶的表達。在優化比例下實驗結果比較表明,使用TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)在41種細胞類型中的36種細胞中的熒光素酶表達優于或者等于競爭品牌;在17種細胞中TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemLipofectamine®2000表達水平的2倍,具體細胞在圖中用?表示。



TransIT-X2轉染試劑

2. 使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System細胞中GFP表達水平較高

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)將編碼EGFP的質粒DNA轉染到A549CHO-K1HepG2LNCaPMDCKPC-12、原代人乳腺上皮細胞(HMEC)和原代正常人真皮成纖維細胞(NHDF)。使用4-8μl TransIT-X2®MirusBio)遞送2μg DNA。使用Zeiss Axiovert S100在轉染后48小時拍照(32X)倒置熒光顯微鏡 *代表原代細胞。


TransIT-X2轉染試劑

3.使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System在多個細胞系和原代細胞中的GFP轉染效率較高

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)將編碼EGFP的質粒DNA轉染到A549CHO-K1Hep G2MDCKLNCaPPC-12、原代人乳腺上皮細胞(HMEC)和原代正常人真皮成纖維細胞(NHDF)中。使用0.2-0.4μl TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)在96孔板中進行轉染,以遞送0.1μg DNA(轉染試劑:DNA的比率2:13:14:1)。轉染48小時后,用guava® easyCyte™ 5HT流式細胞儀(MilliporeSigma)對三個孔進行分析。 *代表原代細胞。


TransIT-X2轉染試劑

4. 使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System轉染質粒DNAsiRNA

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)將Cy®5標記的編碼核YFP質粒DNACy®3標記的siRNA轉染到HeLa細胞。使用4μL TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)在6孔板中用聚-L-賴氨酸(PLL)涂層的蓋玻片進行轉染,以遞送2μg DNA2:1試劑:DNA比)和25 nM siRNA。使用Alexa Fluor®350 PhalloidinThermo Fisher Scientific)對肌動蛋白細胞骨架進行染色。在轉染后24小時使用Nikon A1R共焦顯微鏡拍攝圖像(63X)。圖像:黃色(核YFP)、藍色(Cy®5標記的DNA)、紅色(Cy™3標記的siRNA)、綠色(肌動蛋白細胞骨架)。


TransIT-X2轉染試劑

5. TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemLipofectamine®2000具有更高的敲除率

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)和Lipofectamine®2000轉染試劑(Thermo Fisher Scientific)用于轉染靶向內源性蛋白GAPDHaha1siRNA,或在原代正常人真皮成纖維細胞(NHDF)中遞送非靶向對照。根據說明書,使用4μl TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)或6μl Lipofectamine®2000Thermo Fisher Scientific)和25nM siRNA6孔板中轉染細胞。使用qRT-PCR測定GAPDHaha1mRNA相對于18S rRNA水平的量,然后在轉染后48小時縮放到陰性對照的mRNA水平。誤差條表示孔中的標準偏差。


TransIT-X2轉染試劑

6.使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System有效遞送miRNA 可降低PTK9 mRNA水平

TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemMirus Bio)和Lipofectamine®2000轉染試劑(Thermo Fisher Scientific)用于轉染帶有Pre-miR™ hsa-miR-1 miRNA前體(Thermo Fisher Scientific)或mirVana™ miRNA模擬物(Thermo Fisher Scientific)的T47D細胞miR-1兩者都能降低PTK9 mRNA水平。轉染Pre-miR陰性對照以評估基線mRNA水平。根據每個制造商的方案,使用3μl TransIT-X2®Mirus Bio)或Lipofectamine®2000Thermo Fisher Scientific)和50 nM miRNA12孔板中轉染細胞。使用qRT-PCR測量PTK9 mRNA相對于18S rRNA水平的量,然后在轉染后48小時將其換算為陰性對照的mRNA水平。誤差條表示復孔的標準偏差。 


用于


TransIT-X2轉染試劑

質粒DNAgRNA寡核苷酸轉染

Cas9蛋白和gRNA都可以由質粒DNA編碼用于轉染。或者Cas9可以像質粒DNA一樣被轉染,gRNA可以作為RNA寡核苷酸。

這些方法的優點包括:

 低成本-質粒DNA是一種可再生、經濟高效的格式

 靈活性-Cas9gRNA質粒適用于穩定或瞬時轉染

 易于使用-gRNA寡核苷酸格式可將Cas9簡單地重新定位到不同的位點


TransIT-X2轉染試劑

7.Cas9質粒DNAgRNA寡核苷酸進行高效基因組編輯

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System24孔板的2µl/孔,Mirus Bio),用0.5µg編碼pDNACas9Millipore Sigma)和50 nM PPIB靶向兩部分gRNADharmacon/GE Healthcare)共轉染HEK 293T/17U2OSNHDF細胞。T7E1錯配檢測法用于測定轉染后48小時的切割效率。

 

Cas9/gRNA核糖核蛋白(RNP)轉染

純化的Cas9蛋白可與gRNA結合,形成RNP復合物,將其遞送至細胞,用于快速高效的基因組編輯。

基于RNP的基因組編輯的好處

 高效轉染-Cas9/gRNA復合物轉染至多種細胞類型,包括難以轉染的細胞,如免疫細胞和干細胞

 高特異性-預先形成的RNP復合物提供基因組編輯活動的快速脈沖

● DNA-無插入突變風險

TransIT-X2轉染試劑

8. TransIT-X2®RNP轉染方面優于其他試劑

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System1µl/孔,Mirus Bio)或Lipofectamine®CRISPRMAX™ 1.5µl/孔和1µl/Lipofectamine®Cas9 Plus™ 試劑,Thermo Fisher)或Lipofectamine®RNAiMAX1.5µl/孔,Thermo Fisher)或Lipofectamine™30001.5µl/孔和1µl/P3000™ 試劑,Thermo Fisher)將由靶向2部分gRNAIDT)的PPIB(親環蛋白B)和Cas9蛋白(PNA Bio)組成的蛋白組成的核糖核蛋白(RNP)復合物遞送到(AHEK 293T/17和(BU2OS細胞中。根據操作手冊,采用24孔板,用6nM Cas9蛋白(PNA Bio)測試不同水平的gRNA6nM12nM)。T7E1錯配檢測法用于測定轉染后48小時的切割效率。


TransIT-X2轉染試劑

9.Cas9gRNA核糖核蛋白復合物在IPS細胞中進行基因組編輯

TransIT-X2® Dynamic Delivery System用于在人誘導多能干細胞(iPSC)中轉染Cas9蛋白/gRNA核糖核蛋白(RNP)復合物。T7E1錯配方法用于測定轉染后48小時的切割效率。


供應商產品編號產品名稱中文產品名稱規格
MirusbioMIR 6000TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/適用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂質體高效低毒轉染試劑1.5ml
MirusbioMIR 6003TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/適用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂質體高效低毒轉染試劑0.3ml
MirusbioMIR 6004TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/適用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂質體高效低毒轉染試劑0.75ml
MirusbioMIR 6005TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/適用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂質體高效低毒轉染試劑5x1.5ml
MirusbioMIR 6006TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/適用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂質體高效低毒轉染試劑10x1.5ml
MirusbioMIR 6010TransIT-X2® Dynamic Delivery SystemTransIT-X2® Dynamic Delivery System/適用于DNAsiRNA/miRNACRISPR RNP的非脂質體高效低毒轉染試劑0.1ml



TransIT-X2轉染試劑

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