這項研究聚焦于探索-KRT5+細胞如何調控CD4+/CD8+效應T細胞，以及這些T細胞在肺泡再生中的作用。作者發現，異常修復的KRT5+細胞通過CXCR3和Integrin α4β7招募CD4+/CD8+效應T細胞并促進其駐留，效應T細胞通過分泌IFNγ抑制club細胞向AT2細胞的分化，清除CD4+/CD8+T細胞或中和IFNγ，阻斷CXCR3或Integrin α4β7，均能促進AT2細胞再生及肺功能修復。

作者觀察到發生異常修復時肺部出現大量的組織駐留CD4+/CD8+ T細胞，并與KRT5+基底樣細胞呈現時空共定位，隨即使用Bio X Cell抗體進行體內清除來評估這些T細胞的功能。

結果清除任一種T細胞，都顯著加快小鼠體重恢復，提高血氧飽和度，減輕肺纖維化。而在細胞層面，體內清除CD4+或CD8+ T細胞后，譜系示蹤技術觀察到Scgb1a1（標記所有club細胞）來源的AT2細胞持續地顯著增加。這些結果表明CD4+/CD8+ T細胞在病毒清除后持續駐留，并抑制club細胞向AT2細胞分化，及肺功能恢復。

Bio X Cell抗體使用：

從流感感染7 天后（避免影響病毒清除）開始，小鼠每三天腹腔注射500μg CD4抗體（#BE0003-1，克隆GK1.5） 或CD8α抗體（#BE0004-1，克隆53-6.7），同型對照組分別注射#BE0090（克隆LTF-2）或#BE0089（克隆2A3），流式分析驗證清除效果，感染后第14天和21天分析。

為排除體內復雜環境的干擾，作者建立了 3D 上皮類器官與 T 細胞的體外共培養模型，以檢測細胞水平的直接互作，并鑒定其中的關鍵作用分子。在這一體外活細胞模型中，Bio X Cell 抗體同樣表現出卓-越的性能。

作者發現CD4+/CD8+ T細胞在體外模型中傾向于直接黏附氣道類器官而非肺泡類器官，并且病毒感染后趨化因子Cxcl10/11及其受體Cxcr3的基因表達上調。隨后在共培養模型中使用Bio X Cell抗體阻斷CXCR3驗證其作用。結果CXCR3抗體處理顯著降低CD4+/CD8+ T細胞對氣道類器官的黏附能力，證實T細胞招募依賴于CXCL10/11-CXCR3軸的趨化作用。

而且CD4+/CD8+ T細胞在共培養中強效抑制club細胞形成肺泡類器官，而加入Bio X Cell抗體中和IFNγ后，這種抑制完-全被逆轉，中和TNFα則無效，表明T細胞通過分泌IFNγ抑制肺泡再生。

Bio X Cell抗體使用：

培養基中加入CXCR3抗體（#BE0249，克隆CXCR3-173）、IFNγ抗體（#BE0055，克隆XMG1.2）、TNFα抗體（#BE0058，克隆XT3.11）及同型對照，均為50μg/mL，每三天更換一次培養基，第10天收獲類器官進行分析。

明確了機制后，作者嘗試通過阻斷T細胞的招募和駐留來治療。

IFNγ中和抗體治療改善了肺功能，使損傷區域的SFTPC+細胞獲得與T細胞清除相當的增加，并顯著降低趨化因子表達及組織駐留T細胞的數量。而使用抗體在小鼠體內阻斷CXCR3或Integrin α4β7均顯著減少肺駐留 T 細胞，改善小鼠的血氧飽和度，降低肺纖維化。

這些結果再次確認這些分子在KRT5?細胞阻礙肺泡再生中的關鍵作用，并為治療嚴重感染導致的肺損傷提供可行的轉化方案。

Bio X Cell抗體使用：

從流感感染7 天后開始，小鼠每三天腹腔注射500μg IFNγ抗體（#BE0055，克隆XMG1.2），250μg CXCR3抗體（#BE0249，克隆CXCR3-173）或400μg Integrin α4β7抗體（#BE0034，克隆DAKTK32），并設置同型對照組，感染后第14天和21天分析。

這項研究通過在小鼠體內模型和3D類器官-免疫共培養體外模型之間的反復驗證，極大地增強了研究結論的可靠性，也為后續開發病毒感染后肺纖維化、長新冠等后遺癥的藥物提供了多個明確的候選靶點。

而Bio X Cell高品質的InVivoMAb系列功能抗體，憑借其高純度、低內毒素和無防腐劑的優勢，尤其適合于小鼠體內和3D類器官等各類活體、活細胞的長時程實驗，在不同模型間為數據連貫性和結論可靠性保駕護航。

參考文獻